仅2月接收！深度复现仝小林院士团队孟德尔随机化＋网络药理学＋分子对接分析套路

哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，现有西药存在副作用大、患者依从性低等问题。中药复方阳咳散（YKS）在临床实践中显示可缓解哮喘症状、减少急性发作，但其活性成分及作用机制尚未明确，限制了临床应用。

2025年5月26日，长春中医药大学附属医院的仝小林院士团队联动网络药理学＋分子对接＋孟德尔随机化等方法，在期刊《Chinese Medicine》（医学二区，IF=5.7）发表题为：“Yangke powder alleviates OVA-induced allergic asthma by inhibiting the PI3K/AKT/NF-κB signaling pathway”的研究论文，旨在通过多学科技术揭示YKS治疗哮喘的物质基础及分子机制，为其科学应用提供依据。

研究采用“成分分析-靶点预测-机制验证”的整合策略：

成分鉴定：通过UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术分析YKS体外成分及入血成分；

靶点预测：结合网络药理学、生物信息学（差异基因分析、WGCNA模块分析）筛选哮喘相关靶点与YKS作用靶点交集；

机制验证：

• 分子对接验证活性成分与核心靶点（AKT1、TNF、IL1B）结合能力；
• 孟德尔随机化（MR）分析靶点与哮喘的因果关系；
• 动物实验（OVA诱导哮喘小鼠模型）验证YKS对气道阻力、炎症因子及PI3K/AKT/NF-κB通路的影响。

图1 研究设计流程图

主要研究结果

研究通过UPLC-MS鉴定出，YKS共含174种化合物（39种黄酮类），其中49种（如山柰酚、去甲麻黄碱、木犀草苷、金雀异黄素、芦丁）在血液中检测到，表明它们是有效成分。

图2 YKS的体外物质基础及血吸收成分分析

A.YKS体外物质基础总离子图；B.空白血清总离子图；C.含药血清总离子图；D.YKS的49种血吸收活性成分

研究利用网络药理学确定了YKS的关键哮喘治疗靶点，包括AKT1、TNF、IL1B、EGFR、IFNG、IL4、CASP3和PTGS2，而山奈酚和去甲麻黄碱是YKS中治疗哮喘的主要活性化合物，可能是其治疗哮喘的核心要素。

图3 YKS治疗哮喘的机制预测

A.YKS治疗哮喘的核心靶点；B.PPI网络图；C.网络图的构建；D.DO富集分析；E.GO富集分析；F.KEGG富集分析

分子对接证实了山奈酚和去甲麻黄碱与核心靶点AKT1、TNF和IL1B的相互作用，强调了它们在哮喘治疗中的潜在治疗作用。

图4 分子对接图

MR结果则显示，仅AKT1与哮喘之间存在直接因果关联（OR=1.097, P=0.013）。

此外，研究还发现，YKS主要通过PI3K、Akt和NF-κB通路调节哮喘，改善气道阻力，减少炎症、粘液产生和气道重塑，并降低Th2细胞因子和IgE水平。

图5 YKS缓解卵清蛋白诱导的小鼠哮喘模型中的肺功能障碍、气道炎症、重塑及黏液过度分泌：

(A)：小鼠OVA诱导哮喘模型示意图；(B)：通过小鼠PenH指数评估支气管收缩程度；(C)：小鼠气道阻力测量，表示为sRAW（气道特异性阻力）； (D)：肺组织苏木精-伊红（HE）染色组织学评估（200倍放大）；(E)：马松三色染色技术分析肺组织（200倍放大）； (F)：高碘酸希夫（PAS）染色检测肺组织黏液分泌（200倍放大）； (G–I)：肺组织详细定量组织病理学评估

综上所述，YKS通过山柰酚和去甲麻黄碱等核心成分靶向调控AKT1、TNF、IL1B等关键靶点，抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路，从而减轻OVA诱导的哮喘模型气道炎症、黏液高分泌及气道重塑。